FUNDAMENTOS
DE LA TÉCNICA
La cromatografía
líquida
de alta resolución es una de las técnica de
separación
más ampliamente utilizada debido a su versatilidad y amplio
campo
de aplicación. Los componentes de la muestra, previamente
disueltos
en un disolvente adecuado (fase móvil), son forzados a atravesar
la columna cromatográfica gracias a la aplicación de
altas
presiones. El material interno de la columna, fase estacionaria,
está
constituido por un relleno capaz de retener de forma selectiva los
componentes
de la mezcla. La resolución de esta separación depende de
la interacción entre la fase estacionaria y la fase
móvil,
pudiendo ser manipulada a través de la elección de
diferentes
mezclas disolventes y distintos tipo de relleno. Como resultado final
los
componentes de la mezcla salen de la columna separados en
función
de sus tiempos de retención en lo que constituye el
cromatograma.
A través del cromatograma se puede realizar la
identificación
cualitativa y cuantitativa de las especies separadas.
APLICACIONES
El
campo
de aplicación
de esta técnica es muy extenso. Algunas de las aplicaciones se
enumeran
a continuación:
- Productos
farmacéuticos:
antibióticos, sedantes, esteroides, analgésicos
- Bioquímica:
aminoácidos,
proteínas, carbohidratos, lípidos
- Alimentación:
edulcorantes
artificiales, antioxidantes, aditivos
- Contaminantes:
plaguicidas,
herbicidas, fenoles, PCBs
- Química
forense: drogas,
venenos, alcohol en sangre, narcóticos
- Medicina
clínica: ácidos
biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina, estrógenos.
REQUISITOS
Y LIMITACIONES
- Las
muestras se proporcionarán
debidamente filtradas
- La
cantidad mínima para
realizar el ensayo es de 0.5 ml
- Las muestras se entregarán en mano al responsable de
la técnica, junto con la hoja de solicitud.
- Junto
con la entrega de la muestra
se entregarán los patrones preparados en las mismas condiciones
que esta.
- El
rango
de volumen de inyección
que cubre el equipo es de 1 a 50 µl.
- La muestras que no se recojan en el plazo de diez
días serán desechadas en el contenedor adecuado.
DESCRIPCIÓN
DEL EQUIPO
Equipo:
Cromatografía líquida de alto rendimiento
Marca:
SHIMAZDU
Modelo:
LC-7A
Fecha
de instalación:
Noviembre 1989
Accesorios
y gases:
- Modulo
de comunicación
CBM-10A
- Gases:
Helio
- Dos
bombas de titanio modelo
LC-7A
- Dos
detectores:
1)
Fotodiodo array UV-VIS
modelo SPD-M6A. Permite detectar todas las longitudes de la
lámpara
desde 195 a 600nm.
2)
Índice de refracción
modelo RID6A.
- Horno
CTO6A
- Autoinyector
modelo SIL-IOA
- Ordenador
Pentium.
- Impresora
Epson 600C
|
|
|
EXPERIENCIA
DEL EQUIPO
El HPLC de la Universidad
de Alicante lleva en funcionamiento desde 1989. Desde entonces se han
realizado
numerosas determinaciones y análisis. Algunos de ellos se
enumeran
a continuación:
- Medicina:
Control de toxicidad
en muestras de orina.
- Determinación
de azucares
en muestras de origen animal y vegetal
- Química
agrícola:
Determinación de quelatos de hierro en fertilizantes.
- Ingeniería
Química:
Determinación de jabones en lodos de depuradora.
- Contaminación:
Determinación
de fenoles.
- Bioquímica:
Determinación
de aminoácidos.
PERSONAL
José
Maria Ramírez Oltra
Ana Paula
Beltrá Alba
Tel:
965903400 Ext:1245
|
